Moleküler tanı: Ne olduğu ve ne için olduğu

Moleküler tanı, örneğin, genetik hastalıkların veya kanserin göstergesi olabilecek DNA'daki değişiklikleri tanımlamayı amaçlayan bir dizi moleküler tekniğe karşılık gelir. Ek olarak, moleküler teknikler, daha hızlı ve daha doğru bir teşhis yöntemini temsil ettikleri için, bulaşıcı hastalıkların tanımlanması ve onaylanması için yaygın olarak kullanılmaktadır.

Moleküler tanı pahalıdır ve bu nedenle hekimler tarafından çok sık talep edilmemekle birlikte, değişimin varlığı, organizmanın işleyişini ve hastanın hastalığa verdiği yanıtı etkileyebilecek şekilde kesin sonuçlar vermektedir. tedavisi.

Ne için

Moleküler tanı çeşitli amaçlarla gerçekleştirilebilir, ana olanlar:

• Kronik Miyeloid Lösemi'nin (KML) karakteristiği olan BCR-ABL translokasyonunun tanımlanması gibi lösemiye ilişkin mutasyonların tanımlanması;
• Herediter hemokromatoz, polisitemi vera, trombositemi ve trombofili gibi hematolojik hastalıkların mutasyonları, örneğin, trombofili ve tedavi nasıl yapıldığını anlamak;
• Örneğin, kolorektal, akciğer, meme ve beyin kanseri gibi kanser oluşumunu gösteren moleküler değişiklikler;
• HPV virüsünün tanımlanmasına ek olarak, hepatit, üretrit, toksoplazmoz, leishmaniasis gibi bulaşıcı hastalıkların teşhisi.

Moleküler tanı, diğer diagnostik tekniklere göre pahalı kabul edilmesine rağmen, belirli bir hastalık ile ilgili değişikliği ve bu değişimin organizmadaki etki derecesini bildirebildiğinden, kişinin tedavisine yardımcı olduğundan daha doğrudur.

Çeşitli hastalıkların teşhisinde kullanılmaya ek olarak, moleküler teknikler, özellikle kanserli kişilerde, tedaviye verilen cevabı değerlendirmek için, hastalıkların evrimini ve nüksetmesini gösteren en etkili yöntemlerden biri olarak da kullanılmaktadır.

Nasıl yapılır

Moleküler tanı herhangi bir örnekle yapılabilir ve doktordan hastanın idrar, tükürük veya çoğu zaman kan olabilen durumu hakkında bilgi vermesi istenir. Sınav için hızlı veya başka bir hazırlık yapılması gerekli değildir.

Numune toplanır ve doktora danışarak veya muayeneyi veya yapılması gereken araştırma türünü bildirerek laboratuvara gönderilir. Yapılan moleküler teknik, istenen muayeneye bağlıdır ve nihai hedefi, hekimin istediği değişimin varlığını veya yokluğunu tanımlamak olan bir dizi kesin prosedürü içerir.

Genellikle sadece az miktarda örnek kullanılır, geri kalanı saklanır, eğer gerekirse, test tekrarlanır.

Ana moleküler tekniklerin neler olduğunu görün

PCR

Polimeraz Zincir Reaksiyonu için kısa olan PCR, mutasyonları tanımlamak ve böylece hastalıkların teşhisinde yardımcı olmak amacıyla DNA veya RNA gibi genetik materyalin bir parçasını amplifiye etmekten oluşan moleküler bir tekniktir.

Bu teknik, genetik materyalin ekstraksiyonundan ve saflaştırılmasından yapılır, daha sonra, bileşenlerden birinin, istenen muayeneye göre değişen ve işlevi materyali parçalara ayırmak olan bir kısıtlama enzimi olduğu bir karışıma yerleştirilir. olası bir genetik değişikliği tanımlamak. Karışım, muayeneye göre profesyonel tarafından belirtilen sıcaklık değişimi boyunca hareket eden ve bu şekilde genetik fragmanın çoğaltılmasına izin veren bir cihaz olan bir termosiklöre yerleştirilir. Geleneksel PCR durumunda, amplifikasyondan sonra, PCR ürünü, parçaların ağırlığı ve boyutuna dayanan bir moleküler teknik olan elektroforeze tabi tutulmaktadır, yani bu özelliklere göre, analizi yapılmış olan bir bant modeli üretilmektedir. Pozitif kontrolün bandına dayanır, yani, genetik değişime karşılık gelen bantta.

QPCR olarak da adlandırılan gerçek zamanlı PCR, bir tür kantitatif PCR'dir, yani genetik değişimin tanımlanmasına ek olarak, gen ifadesi hakkında bilgi verebilir, yani, değiştirilmiş genin organizmada ne kadar ifade edildiği ve teşhis ve tedaviye yardımcı olmak için kullanılabilir. Gerçek zamanlı PCR, elektroforez gerektirmez, genetik materyalin tüm amplifikasyonu ve analizi süreci, bir aparatla yapılır ve sonuç, eğitimli bir sağlık uzmanı tarafından yorumlanır.

dizileme

Sıralama, DNA'nın nükleotid dizisini belirlemekten oluşan moleküler bir tekniktir. Sekanslama, PCR benzeri bir reaksiyondan gerçekleşir, bununla birlikte, amplifikasyon karışımında, florokromların eklenmesiyle modifiye edilen nükleotidler eklenir, materyal amplifiye edildiğinde, modifiye edilmiş nükleotidler DNA'ya dahil edilir ve birkaç fragman oluşturur. sıralama ürününe karşılık gelir.

Reaksiyon ürünü, DNA dizisi olarak adlandırılan bir aparata yerleştirilir, burada, parçalar lazerin aparatı tarafından vurulduğu için, fluorochromlar uyarılır, aparat tarafından pikler vasıtasıyla işaret edilen, her biri karşılık gelen pik floresan yayılır. bir nükleotide Reaksiyonun sonunda, ekipman DNA dizisini bilgilendirecek ve böylece doktorun genetik hastalıkların teşhisinde yardımcı olacaktır.